| TECNICAS DE TINCION DIFERENCIAL BANDEO Q.- Técnica en la cual se utiliza quinacrina, produciéndose patrones fluorescentes y no fluorescentes en los cromosomas metafásicos que al ser observados con microscopio de fluorescencia, revelan un patrón característico para cada par cromosómico. Aunque el mecanismo involucrado en este bandeo no es aún claro, se acepta que las bandas fluorescentes se encuentran en regiones cromosómicas donde el ADN es rico en adenina y timina. Recientes estudios demuestran que el ADN rico en AT incentiva la fluorescencia de la quinacrina, mientras que el ADN rico en GC reprime la fluorescencia. También se asegura que las interacciones ADN-proteína son impo rtantes para el bandeamiento Q. BANDEO G.- Las bandas Giemsa (bandas G) se obtienen por digestión de los cromosomas con un enzima proteolítica, siendo la tripsina la más usada en los análisis cromosómicos. Esta técnica es descrita como GTG (bandas-G por tripsina usando Giemsa). A través de esta se obtiene un patrón característico para cada par de cromosomas homólogos, similar al encontrado en bandeo Q. El mecanismo del bandeamiento G todavía no es claro, pero los patrones de bandeo podrían ser el resultado de la interacción entre el ADN y las proteínas cromosómicas. Pruebas de laboratorio han demostrado que la mayoría de técnicas de bandeo G extraen proteínas cromosómicas, las regiones en donde esto ocurre no reaccionarán con el colorante. BANDEO R.- Este tipo de bandeo se produce después del tratamiento de las placas que contienen la extensión de cromosomas a altas temperaturas en varios tampones, seguido de la tinción que puede ser tanto con naranja de acridina como con Giemsa. Esta técnica produce un patrón de bandas opuesto al patrón de bandeo G o Q así, las bandas que no son bien teñidas por el bandeamiento G o Q, son intensamente teñidas por el proceso de bandeamiento R. El mecanismo del bandeo R no es enteramente conocido; el tratamiento con calor induce la desnaturalización de proteínas cromosómicas, así como de las secuencias nucleotídicas enriquecidas con AT, dejando el ADN rico en GC de las bandas R con una configuración natural. La desnaturalización selectiva del ADN rico en AT puede ser explorado utilizando naranja de acridina después del tratamiento con calor en varios tampones. TECNICAS DE TINCION SELECTIVA BANDEO C.- El bandeo C produce la tinción selectiva de la heterocromatina constitutiva. Este material se encuentra sobre todo en regiones centroméricas y pericentroméricas, así como en los telómeros y excepcionalmente en las zonas intersticiales de los brazos cromosómicos. Debido a que estas bandas se localizan principalmente en regiones centroméricas de los cromosomas humanos, son conocidas como bandas C. Se puede utilizar tanto hidróxido de sodio como de bario para desnaturalizar el ADN cromosómico, obteniéndose un patrón similar de bandas C con ambos desnaturalizadores. Se ha visto que la técnica de bandeo C tiene como consecuencia una extracción de hasta un 50% del ADN cromosómico, de preferencia se extrae el ADN localizado en los brazos cromosómicos, por lo que cabe suponer que la heterocromatina localizada en las regiones centroméricas mantiene una estructura más compacta y resistente a los tratamientos, poniéndose de esa forma de manifiesto con bandas C.
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