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  perspectiva de poder aplicar la AP-PCR a grandes series de muestras de hemolinfa, se realizó un grupo de experimentaciones que tuvo como meta disponer de un protocolo simple y eficaz para extraer ADN.
Por ello, las células sanguíneas (hemocitos) fueron sometidos a ebullición en diversos tampones y luego centrifugados.  Si bien este protocolo reducía de forma drástica la cantidad de tiempo utilizado durante el proceso, la calidad del ADN resultó ser muy variable, afectando por consiguiente la reproducibilidad de la AP-PCR.  El uso del reactivo DNAzol permitió resolver este problema.
En estas condiciones fue posible obtener regularmente productos de amplificación para muestras de hemolinfa con volúmenes entre 300 y 500
ml.

APLICACION
Con este protocolo fue posible efectuar un trabajo exploratorio para asociar potenciales marcadores genéticos y características inmunitarias en el camarón P. vannamei (Robalino, 1997).  Utilizando la misma muestra de hemolinfa, y gracias a seis pruebas que han sido recientemente puestas a punto en CENAIM, fue posible cuantificar diversos tipos de indicadores inmunitarios: cantidad de hemocitos, actividad antibacteriana del plasma, metabolismo respiratorio de los hemocitos y cantidades de alfa 2 macroglobulina, de una aglutinina y del factor de coagulación.
Fueron analizados doce camarones sobrevivientes, a partir de un total de 100, para los cuales se determinaron sus perfiles RAPDs con la ayuda de dos cebadores permitiendo su caracterización genética.

CONCLUSIONES
  1. Este trabajo contribuye a iniciar programas de selección y domesticación de líneas de camarones P. vannamei, ya que se podría realizar simultáneamente la caracterización genética e inmunitaria de camarones adultos a partir de reducidos volúmenes de hemolinfa.

  1. Es factible la creación de una base genética de datos utilizando diferentes poblaciones silvestres y mantenidas en cautiverio, de P. vannamei, para iniciar la búsqueda de potenciales marcadores genéticos asociados con orígenes geográficos determinados y/o características fenotípicas de interés.



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