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IMPLANTACION Y APLICACION DE LA
TECNICA AP-PCR (ALEATORY - PRIMED POLIMERASE CHAIN
REACTION) PARA LA CARACTERIZACION GENETICA DEL CAMARON
BLANCO Penaeus vannamei.
José Melena
Cevallos. CENAIM - Guayaquil.
OBJETIVOS
- Iniciar el
estudio de la variabilidad genética del camarón
blanco Penaeus vannamei.
- Identificar
potenciales marcadores genéticos asociados con
características fenotípicas de interés para el
sector productor.
INTRODUCCION
Para iniciar un estudio sobre la diversidad
genética del camarón blanco Penaeus vannamei,
el presente trabajo fue dirigido fundamentalmente a
implantar la técnica AP-PCR (Reacción en cadena de la
polimerasa iniciada aleatoriamente) y proceder a su
aplicación para obtener productos de amplificación que
permitan analizar el ADN genómico según el concepto de
RAPDs (Random amplified polymorphism DNA).
La técnica AP-PCR fue desarrollada por Williams y cols.
y Welsh & Mclelland en 1990, como una variante de
la PCR. Se caracteriza por
utilizar cebadores cortos (10-15 nucleótidos) de
secuencias aleatorias, para amplificar varios segmentos
del genoma. Estos productos amplificados permiten
establecer perfiles electroforéticos de cualquier genoma
sin necesidad de tener información previa sobre él.
Tales perfiles son denominados perfiles RAPDs y se basan
en la presencia o ausencia de productos amplificados
(bandas) específicos de un organismo o población en
particular.
Actualmente, la AP-PCR es una de las técnicas de marcaje
genético de mayor aplicación por su simplicidad y
economía, siendo ya utilizada en una amplia variedad de
organismos para estudiar su variabilidad genética,
relaciones filogenéticas y determinación de marcadores
útiles en selección, especialmente en plantas (Martin y
cols., 1991). En estudios de variabilidad
genética, la AP-PCR ha resultado ser más sensible que
otras técnicas para poner en evidencia la variabilidad
(Baruffi y cols., 1995).
MATERIALES Y METODOS
Animales y extracciones de ADN
En la fase de implantación se utilizaron camarones
reproductores del departamento de maduración del CENAIM,
extrayendo muestras de diferentes tejidos, entre ellos
hemolinfa; para determinar un protocolo de extracción de
ADN y, subsecuentemente, desarrollar un protocolo
reproducible de AP-PCR.
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